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        用細(xì)胞凋亡檢測試劑盒的注意事項(xiàng)


        為保證得到理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果在使用此試劑盒之前請認(rèn)真閱讀該注意事項(xiàng)。
         
        1.旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
        2.Annexin V-FITC和Propidium iodide是光敏物質(zhì),在保存與操作時請注意避光。
        3.Propidium iodide(PI)能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用。
        4.在細(xì)胞洗滌的最后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
        5.PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首先進(jìn)行Annexin V-FITC染色,上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
        6.整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作。
        7.反應(yīng)完畢后請盡快檢測,因?yàn)榧?xì)胞凋亡是一個動態(tài)的過程,反應(yīng)1小時后熒光強(qiáng)度就開始衰變。
        8.成功的檢測凋亡受以下幾種因素的影響,如細(xì)胞類型、細(xì)胞膜上PS的密度、發(fā)生凋亡時PS翻轉(zhuǎn)的比例、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的方法、所用試劑、誘導(dǎo)凋亡的時間等,把這些影響因素進(jìn)行優(yōu)化對實(shí)驗(yàn)成功是非常必要的。

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